2021年, 第41卷, 第3期　刊出日期：2021-05-30

  

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论著
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  卵巢癌组织中CXCR3表达与免疫细胞浸润的相关性研究

  高境泽，吴霞

  现代免疫学. 2021, 41(3): 177-183.

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  该研究使用癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas, TCGA）数据库中的卵巢癌（ovarian cancer, OC）数据集对患者进行有关CXCR3的生存及差异表达基因分析，再对CXCR3high组的差异表达基因进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes， KEGG）富集分析。同时，使用单样本基因集富集分析（Single Sample Gene Set Enrichment Analysis, ssGSEA)方法分析OC组织中各免疫细胞组分CXCR3表达水平，评估其与各免疫细胞组分表达间的相关性。研究结果显示，OC组织中CXCR3高表达是患者预后良好的预测基因；肿瘤组织中CXCR3表达与PD-1/PD-L1通路及Th1分化通路密切关联，并可能在这两条通路中发挥关键的生物学功能；CXCR3高表达与肿瘤微环境中CD8⁺T细胞、CTL及DC的富集显著相关（r值为0.48、0.75和0.64）。由此，CXCR3在肿瘤局部免疫效应细胞募集、机体抗肿瘤免疫应答中具有重要作用，其有望成为筛选适合免疫治疗OC患者的生物标志物之一。
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  狼疮肾炎患者不典型抗中性粒细胞胞质抗体检测的临床意义

  陈惠娟，詹富国，高丽钦，等

  现代免疫学. 2021, 41(3): 184-189.

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  为探讨不典型抗中性粒细胞胞质抗体（atypical antineutrophil cytoplasmic antibody，aANCA）与狼疮肾炎（lupus nephritis，LN）患者病情的关系，收集2010年1月至2018年12月于福建医科大学附属第一医院肾内科住院治疗的LN患者，采用间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence assay，IIF）测定血清ANCA水平，分析25例aANCA阳性和61例ANCA阴性患者，比较两组的实验室检测结果；同时分析15例aANCA发生血清转换的患者的实验室检测结果。结果显示，aANCA阳性组和ANCA阴性组的抗髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）和抗蛋白酶3（proteinase 3，PR3）抗体均为阴性；aANCA阳性组抗dsDNA抗体水平、抗核小体抗体阳性率显著高于ANCA阴性组（P值分别为0.001、0.010）；aANCA阳性组补体C3、C4水平则显著低于ANCA阴性组（P值分别为0.022、0.022）；aANCA阳性组尿隐血的发生率显著高于ANCA阴性组（P=0.026）；就aANCA发生血清转换的患者而言，aANCA阳性组的抗dsDNA抗体水平、抗核小体抗体阳性率显著高于ANCA阴性组（P值分别为0.029、0.013）。以上提示aANCA可能与LN的疾病发生发展过程有关。
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  NOD2基因在巨噬细胞抗结核分枝杆菌中的作用

  朱莉萍，贾春敏，陈南山

  现代免疫学. 2021, 41(3): 190-194.

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  为探究核苷酸结合寡聚化结构域2（nucleotide binding oligomerization domain 2，NOD2）基因在巨噬细胞抗结核分枝杆菌免疫反应中的作用，应用siRNA干扰人巨噬细胞U937中NOD2的表达后用结核分枝杆菌感染U937细胞，采用菌落计数法检测U937细胞对结核分枝杆菌的吞噬及杀伤能力，qRT-PCR检测U937细胞中NOD2 mRNA的表达，ELISA检测细胞上清液中IL-6、IL-8和TNF-α的水平，Western blotting检测细胞中自噬相关蛋白［p62、微管相关蛋白轻链3（micro-tubule-associated protein light chain 3， LC3）］的表达。结果显示，U937细胞感染结核分枝杆菌后，细胞NOD2 mRNA、IL-6、IL-8、TNF-α、p62及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ水平显著上升（P<0.05）；沉默NOD2后，U937细胞吞噬结核分枝杆菌密度及NOD2 mRNA、IL-6、IL-8、TNF-α水平均显著下降（P<0.05），但细胞对结核分枝杆菌的杀伤能力及细胞上清液中p62、LC3 Ⅰ/LC3 Ⅱ水平无显著变化（P>0.05）。该研究提示，NOD2基因可能通过介导炎症反应参与巨噬细胞对抗结核分枝杆菌。
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  离心血液异常分离在多发性骨髓瘤患者Ig检测中的意义

  张靖宇，朱金英，张静，等

  现代免疫学. 2021, 41(3): 195-198.

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  为探究离心血液异常分离在多发性骨髓瘤（multiple myeloma， MM）患者Ig检测中的意义，收集河北省沧州中西医结合医院2010年1月至2019年10月收治的MM患者187例，根据外周血离心结果分为异常组（自上而下依次为血清、红细胞、分离胶、红细胞）和正常组（自上而下依次为血清、分离胶、红细胞），比较两组患者年龄、性别、血浆总蛋白、白蛋白、Ig、血钙、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）、血清肌酐（serum creatinine, Scr)、血红蛋白（hemoglobin，Hb）、血小板以及疾病免疫分型等临床资料及实验室指标的差异；通过检测含不同浓度IgG和IgA的样本，分别绘制剂量-反应曲线，找出血浆IgG和IgA的平衡点浓度；分析两种不同外周血离心结果与Ig钩状效应的关系。结果显示，异常组和正常组在总蛋白、白蛋白、Ig、Hb、疾病免疫分型等指标上差异显著（均P＜0.05），而在年龄、性别、血钙、LDH、Scr和血小板中组间差异不显著（均P＞0.05）；IgG和IgA的平衡点浓度分别约为35.0 g/L和7.0 g/L，达到平衡点后反应的光密度D（570 nm）、D（340 nm）值随着浓度的增加而降低；异常组Ig检测时均存在钩状效应，正常组则部分存在。以上结果表明，MM患者的外周血样本离心后存在异常分离现象，这与总蛋白、白蛋白、Ig、Hb和疾病免疫分型有关；Ig检测存在钩状效应，而异常分离结果提示相应免疫分型的Ig检测时存在浓度假性减低情况，需稀释才能还原真实结果。
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  MMF联合雷公藤多苷在治疗IgA肾病患者中的临床对照研究

  符育群，陈菊

  现代免疫学. 2021, 41(3): 199-203.

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  为探讨吗替麦考酚酯（mycophenolate mofetil， MMF）联合雷公藤多苷在治疗IgA肾病患者中的疗效与安全性，以中南大学湘雅医学院附属海口医院2017年3月至2019年4月收治的124例IgA肾病患者为研究对象，随机分为对照组（62例）和观察组（62例）；对照组给予雷公藤多苷治疗，观察组在此基础上给予MMF治疗；对比两组尿蛋白、血清蛋白、血脂指标、体液免疫指标、肾功能指标及疗效和不良反应。结果显示，治疗后3个月，观察组尿蛋白（2.12±1.23） g/L、血清蛋白（34.08±4.72） g/L，与对照组［（4.46±2.38） g/L、（22.54±4.61） g/L］相比差异显著（均P＜0.05）。治疗后6个月，观察组血清总胆固醇（total cholesterol， TC）、甘油三酯（triglyceride， TG）及C3、IgA水平［（4.03±1.02） mmol/L、（1.12±0.78） mmol/L、（5.72±0.53） g/L、（31.06±3.28） g/L］与对照组［（5.04±1.16） mmol/L、（1.48±0.91） mmol/L、（17.48±1.68） g/L、（52.37±5.51） g/L）］相比显著降低（均P＜0.05）。治疗后6个月，观察组血尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)、尿酸、血肌酐水平［（7.21±1.65） mmol/L、（397.62±12.17） mmol/L、（81.07±11.23） μmol/L］与对照组［（8.16±1.71） mmol/L、（409.11±12.79） mmol/L、（96.83±10.92） μmol/L）］相比显著降低（均P＜0.05）。观察组治疗有效率为96.77%，对照组有效率为85.48%，两组差异显著（P＜0.05）。治疗6个月后，观察组不良反应发生率为8.06%，对照组为6.45%，两组差异无统计学意义（χ2=0.120，P=0.729）。由此，MMF联合雷公藤多苷在治疗IgA肾病患者时可改善其尿蛋白、血清蛋白、血脂、体液免疫和肾功能指标，疗效较好且不良反应发生率低。
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  沉默MyD88抑制NF-κB p65活化对TNF-α诱导的心肌细胞凋亡和炎症损伤的保护作用

  王成，金卫东，郭长磊，等

  现代免疫学. 2021, 41(3): 204-209.

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  为探究沉默髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)抑制NF-κB p65活化对TNF-α诱导的心肌细胞凋亡和炎症损伤的影响，采用TNF-α处理心肌细胞，将其随机分为4组：Control组、TNF-α组、TNF-α+shRNA-NC组和TNF-α+sh-MyD88组。Western blotting检测心肌细胞MyD88蛋白表达水平及NF-κB p65磷酸化情况；ELISA检测细胞培养上清液肌酸激酶同工酶MB（creatine kinase MB，CK-MB）、肌红蛋白（myohemoglobin，Mb）和肌钙蛋白Ⅰ（cardiac troponin Ⅰ, cTnⅠ）及IL-1β、iNOS、IL-6、IL-10水平；FACS检测心肌细胞凋亡情况；5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-bromo-2′-deoxyuridine, BrdU)染色检测心肌细胞增殖情况；RT-PCR检测Ki67、Bcl-2、Bax、c-Myc mRNA表达水平。结果表明，与TNF-α+shRNA-NC组比较，TNF-α+sh-MyD88组MyD88蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）;CK-MB、Mb和cTnⅠ水平显著降低（均P＜0.05）；心肌细胞凋亡率显著降低（P＜0.05）；BrdU染色阳性细胞数显著增多（P＜0.05）；Ki67、c-Myc mRNA水平和Bcl-2 mRNA/Bax mRNA比值显著升高（均P＜0.05）；IL-1β、iNOS、IL-6水平显著降低（均P＜0.05），IL-10水平显著升高（P＜0.05）；p-p65/p65比值显著降低（P＜0.05）。以上结果说明，沉默MyD88抑制NF-κB p65的活化对TNF-α诱导的心肌细胞损伤具有保护作用。
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  miR-30e-5p通过靶向ATG5基因调控肝癌细胞增殖、凋亡及自噬

  李泓町，高丽萍

  现代免疫学. 2021, 41(3): 210-215.

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  为探讨miR-30e-5p对人肝癌细胞增殖、凋亡及自噬的影响及其潜在的分子机制，为肝癌的诊断和治疗提供新的靶点，采用qRT-PCR检测人正常肝细胞HL-7702及人肝癌细胞MHCC97H、Huh7、HCCLM3中miR-30e-5p的表达量，采用脂质体转染技术将miR-30e-5p mimics转染至MHCC97H细胞，用qRT-PCR检测转染效果，MTT法、克隆形成试验、FACS和Western blotting分别检测过表达miR-30e-5p对MHCC97H细胞增殖、凋亡和自噬的影响，双荧光素酶报告基因试验和Western blotting验证miR-30e-5p与自噬相关基因5（autophagy-related gene 5，ATG5）基因的靶向关系。结果显示，与人正常肝细胞HL-7702相比，人肝癌细胞MHCC97H、Huh7和HCCLM3中miR-30e-5p表达水平明显降低（P＜0.05），且在MHCC97H细胞中表达水平最低。过表达miR-30e-5p能够抑制MHCC97H细胞的增殖和克隆形成（P＜0.05），促进MHCC97H细胞凋亡（P＜0.05），抑制MHCC97H细胞自噬（P＜0.05）。miR-30e-5p可明显抑制ATG5 3＇非翻译区（untranslated region, UTR)的相对荧光素酶活性（P＜0.05）。过表达miR-30e-5p能够明显抑制MHCC97H细胞中ATG5 mRNA和蛋白表达（P＜0.05）。该研究提示，过表达miR-30e-5p能够抑制人肝癌细胞MHCC97H的增殖和自噬，促进细胞凋亡，其作用机制可能与miR-30e-5p靶向抑制ATG5基因表达有关。
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  一株CD10单克隆抗体的制备

  翟晋豫，常秋霜，徐星星，等

  现代免疫学. 2021, 41(3): 216-219.

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  CD10在临床应用中常被作为急性白血病和非霍奇金淋巴瘤分类中的诊断指标之一，本研究旨在制备CD10鼠单克隆抗体并将其应用于临床诊断。用原核表达的CD10胞外区段蛋白免疫小鼠，经细胞融合后筛选出一株可分泌CD10抗体的细胞株，该抗体经多种临床组织验证，其免疫组化结果与目前市售的进口抗体染色结果相一致。该研究提示，所制备的CD10抗体可应用于临床病理诊断。
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  卵巢早衰患者血清TNF-α、TGF-β1水平及TNF-α基因308G/A 位点多态性分析

  杨贤慧，方霞，刘爱胜，等

  现代免疫学. 2021, 41(3): 220-223.

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  为了解卵巢早衰（premature ovarian failure，POF）患者TNF-α基因308G/A位点单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms，SNP）的分布特征及其与TNF-α、TGF-β1水平之间的相关性，选取2017年4月—2019年5月来深圳龙华区人民医院妇产中心就诊并确诊为POF患者167例为POF组，选择同期非POF健康育龄妇女120例为对照组，采用ELISA检测血清TNF-α、TGF-β1水平，同时应用PCR-限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism，RFLP）法检测TNF-α基因308G/A位点多态性。结果显示，POF患者血清TNF-α和TGF-β1水平分别为（9.02±3.28）pg/mL和（197.24±18.75）pg/mL，明显低于对照组［（21.59±6.86）pg/mL和（463.69±62.54）pg/mL］（均 P<0.05）；POF患者血清TNF-α基因308G/A位点GG基因型及G等位基因检出率分别为85.03%和90.12%，明显高于对照组（62.50%和73.33%）（均P<0.05）；TNF-α基因308G/A位点GG基因型的POF患者血清TNF-α和TGF-β1水平分别为（8.24±3.06）pg/mL和（172.57±15.04）pg/mL，明显低于GA基因型［（11.85±4.07）pg/mL和（292.98±37.60）pg/mL］和AA基因型［（16.67±7.15）pg/mL和（431.67±58.49）pg/mL］（均P<0.05）。该研究提示，POF患者血清TNF-α和TGF-β1表达水平明显降低，且TNF-α基因308G/A位点多态性与TNF-α、TGF-β1水平存在一定的相关性，可能是导致POF的危险遗传基因之一。
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  特异性免疫治疗对支气管哮喘患儿Treg水平及肺功能的影响

  张义，杨勤，靳蓉，等

  现代免疫学. 2021, 41(3): 224-230.

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  为探讨特异性免疫治疗对支气管哮喘患儿Treg水平及肺功能的影响，选取60例支气管哮喘患儿，随机分为试验组和对照组（30例/组）。对照组给予基础用药治疗，试验组在基础用药治疗的同时给予特异性免疫治疗，比较2组治疗前后Treg水平和肺功能的变化。结果显示，治疗1年后2组CD4⁺CD25^highT细胞、CD4⁺CD25^highCDl27^lowTreg、IL-10及IgG4水平均升高（均P＜0.05），且试验组高于对照组（P＜0.05）；治疗1年后2组TGF-β1、特异性IgE（specific IgE，sIgE）水平均下降（均P＜0.05），且试验组低于对照组（均P＜0.05）；第1秒用力呼气量（forced expiratory volume in the first second，FEV1）、最大呼气流量（peak expiratory flow，PEF）、用力呼出50%肺活量的呼气流量（50% of forced expiratory flow，FEF50）、用力呼出75%肺活量的呼气流量（75% of forced expiratory flow，FEF75）、最大呼气中期流量（maximal mid-expiratory flow，MMEF）、呼出气一氧化氮（fractional exhaled nitric oxide，FeNO）、肺泡呼出气一氧化氮（concentration alveolar nitric oxide，CaNO）的时间、组间、交互作用比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；2组上述肺功能指标均随时间的延长逐渐升高，呼出气参数均随时间的延长逐渐下降，除试验组治疗9个月后与治疗1年后均基本相近外（P＞0.05），组内其余每2个时刻间比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；治疗前2组间肺功能指标和呼出气参数比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），治疗3个月后、6个月后、9个月后、1年后试验组肺功能指标均高于对照组（P＜0.05），呼出气参数均低于对照组（P＜0.05）。该研究提示，对支气管哮喘患儿给予特异性免疫治疗可改善Treg水平，还可改善炎性因子、免疫指标水平，且对肺功能、呼出气参数也有明显的改善作用。
综述
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  癌/睾丸抗原胎盘特异性蛋白1在肿瘤中的研究进展

  孟潇妍，孙雪青，刘忠龙，等

  现代免疫学. 2021, 41(3): 231-235.

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  胎盘特异性蛋白1（placenta specific protein 1，PLAC1）属于癌/睾丸抗原（cancer/testis antigen， CTA），限制性表达于胎盘组织、睾丸及部分肿瘤中。PLAC1高表达于多种实体肿瘤如乳腺癌、结直肠癌与肺癌等，且与肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移以及较差的临床预后相关。其促肿瘤机制可能与Furin/Notch/PTEN通路有关。由于PLAC1抗原有较强的免疫原性，目前有关靶向PLAC1的肿瘤疫苗和基因改造T细胞等免疫治疗的研究正在积极开展中。文章对PLAC1的结构、组织表达特征、在肿瘤进展中的作用以及免疫治疗方面的成果进行综述。
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  STING通路在急性胰腺炎中的研究进展

  李雪鹏，朱楚月，蒋波，等

  现代免疫学. 2021, 41(3): 236-239.

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  急性胰腺炎(acute pancreatitis，AP)是由多种因素引起的胰酶异常激活而出现以严重炎症和腺泡细胞死亡为主要特征的临床上最棘手的急腹症之一。其临床特征具有起病急、进展迅速、预后较差、死亡率高等特点，对人类健康造成极大危害。最近研究发现，虽然胰蛋白酶原激活可能是AP的“扳机点”，但持续的炎症反应是其发病、发展的重要环节。随着AP病因及机制研究的逐渐深入，研究聚焦于免疫炎症反应，而IFN基因激活蛋白( stimulator of interferon genes，STING)作为DNA感受通路下游关键的接头分子，在感受基因组不稳定性和免疫防御方面起着重要的信号传递作用，胞质中的游离DNA可通过DNA感受器环磷酸鸟苷－腺苷酸合成酶(cyclic guanosine monophosphate-adenosine monophosphate synthasec，cGAS)激活STING，进而启动机体的免疫反应。该文就STING信号通路与AP免疫炎症之间的关系作一综述。
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  PD-1/PD-L1在骨肉瘤中的研究进展

  丁晓敏，胡海燕

  现代免疫学. 2021, 41(3): 240-243.

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  PD-1是一种主要表达于活化的CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞和DC等免疫细胞上的跨膜蛋白。PD-1及其配体PD-L1是一对共刺激分子，在正常情况下，这对分子活化后的信号通路可调节外周组织中T细胞的分化，进而调控机体对外来或自身抗原的免疫应答反应，以防免疫过激情况的发生。但在肿瘤发生时，肿瘤细胞高表达PD-L1打破了这一动态平衡，导致了肿瘤细胞的免疫逃逸。该文就PD-1/PD-L1信号通路、骨肉瘤中PD-1/PD-L1的表达、PD-1/PD-L1抑制剂在骨肉瘤中的应用作一综述。
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  Th1/Th2和Th17/Treg模式与复发性流产相关性的研究进展

  贾丹，张杨，陈璐，等

  现代免疫学. 2021, 41(3): 244-248.

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  复发性流产（recurrent spontaneous abortion，RSA）是一种严重影响育龄期女性身心健康的生殖并发症，目前已成为世界性难题，影响家庭幸福指数并威胁生命正常延续。随着对该病认识的不断深入，人们发现该病更多的病因和发病机制有待被阐明。除很多已知因素外，越来越多的学者认为母胎界面Th1/Th2失衡（向Th1偏移，释放较多炎性因子，不利于妊娠的维系）、Th17/Treg失衡（向Th17偏移）、NK细胞失衡（CD56+CD16+/CD56+CD16-NK细胞失衡，细胞毒素释放）、Fas/FasL失衡（无法维持母体免疫细胞的有序凋亡，母体对胚胎的免疫攻击增强）、趋化因子异常（趋化因子及受体的异常无法有序定向招募、活化免疫细胞，母胎界面免疫耐受被打破）和蜕膜化异常（这不仅使母体对胚胎选择机制失常，还无法为胚胎提供营养、保护等作用）可能是导致不明原因复发性流产（unexplained recurrent spontaneous abortion，URSA）的重要原因。该文就Th1/Th2和Th17/Treg平衡与URSA相关性的研究进展作如下综述。
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  PD-1/PD-L1单抗及联合其他疗法增强结直肠癌疗效的研究进展

  刘佳程，胡晨曦，李玥，等

  现代免疫学. 2021, 41(3): 249-254.

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  结直肠癌（colorectal cancer，CRC）是人类常见的肿瘤之一，根据分子标志物不同可将其分为DNA错配修复基因表达缺失型（deficient mismatch repair，dMMR）和错配修复基因表达正常型（proficient mismatch repair，pMMR）CRC。目前，绝大多数CRC患者采用传统外科治疗、放化疗或靶向药物治疗，而PD-1/PD-L1抗体作为重要的免疫检查点抑制剂在dMMR/高频度微卫星不稳定（microsatellite instability-high，MSI-H）型mCRC患者中疗效更优。此外，联合放化疗、免疫疗法或其他潜在治疗手段可进一步提高CRC疗效。该文总结了目前临床上治疗CRC的抗PD-1/PD-L1药物及其疗效和采用联合疗法增强抗PD-1/PD-L1疗效的研究进展。
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  短链脂肪酸在炎症性肠病中的免疫调节作用

  陈玉琼，顾天宇，张思，等

  现代免疫学. 2021, 41(3): 255-259.

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  短链脂肪酸（short chain fatty acid，SCFA）是由未消化的碳水化合物经肠道内厌氧菌酵解产生的一类碳原子数少于6的脂肪酸，包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸和戊酸。研究发现，SCFA对多种肠道局部免疫细胞具有免疫调节作用并在缓解炎症性肠病（inflammatory bowel disease，IBD）中扮演重要角色。该文主要介绍了SCFA在IBD中免疫调节作用的研究进展，并提出了尚需解决的主要问题，以期为SCFA在IBD防治中的进一步研究提供参考。
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  T细胞与肿瘤细胞共培养方法及其应用进展

  赵庆敏，刘永琦，李佳蔚，等

  现代免疫学. 2021, 41(3): 260-264.

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  T细胞作为主要的免疫细胞在肿瘤发展和治疗的各个阶段发挥重要作用，而T细胞与肿瘤细胞共培养是建立T细胞与肿瘤细胞之间相互作用模型的重要途径。但是，有关T细胞与肿瘤细胞共培养方法存在一定难度并缺乏统一性，导致相关研究和应用发展缓慢。该综述主要概述并总结CD4⁺和CD8⁺T细胞与肿瘤细胞共培养的方法和应用。
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  本刊论文中可直接使用的英文缩写

  《现代免疫学》编辑部

  现代免疫学. 2021, 41(3): 264.

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