为探索体外稳定、高效诱导人髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell，MDSC)分化与扩增的实验方法，为体外研究人MDSC功能及作用机制提供新的实验技术支持，收集健康人全血后采用Ficoll密度梯度离心法分离PBMC，贴壁法纯化单核细胞。用人GM-CSF和IL-6 (各10、20、40和80 ng/mL)刺激PBMC或单核细胞4、7、14和21 d，与PBMC共培养3 d；采用FACS检测CD33⁺MDSC、T细胞增殖和CD3⁺IFN-γ⁺T细胞比例。结果显示，常规方法仅诱导PBMC或单核细胞分化为较低比例的CD33⁺MDSC；改善培养方法，用人GM-CSF和IL-6 (各80 ng/mL)刺激单核细胞14 d (每4~5天换1次液)，可诱导出较高比例的CD33⁺MDSC，且CD33⁺MDSC表现出显著抑制T细胞增殖及分泌IFN-γ的功能。该研究提示，改良后的培养方法可高效诱导人单核细胞分化成为CD33⁺MDSC，CD33⁺MDSC具有较强的免疫抑制功能。

间充质干细胞(mesenchymal stromal cell, MSC)具有免疫抑制性，可通过调节各类免疫细胞反应，达到治疗炎症性疾病和自身免疫性疾病的目的。T细胞可识别多种病原体、肿瘤细胞，介导免疫反应并维持机体的免疫记忆和自我耐受。同时，T细胞也是多种炎症性和自身免疫性疾病的主要驱动因素。不同亚群T细胞在免疫反应中发挥不同的作用。其中，MSC通过表面分子以及分泌可溶性因子与T细胞建立直接或间接的联系，相互作用后产生抑制或促进效应。一方面，MSC介导抑制T细胞增殖的免疫效应，以达到免疫抑制作用。另一方面，MSC通过调节各类T细胞亚群分化纠正促炎因子(如IFN-γ、TNF-α)与抑炎因子(如IL-10)之间的失衡。文章就MSC调节各类T细胞亚群分化的机制展开综述。

Runt相关转录因子(Runt-related transcription factor, RUNX)是胚胎发育过程中的主要调节因子，同时也是所有造血谱系所必需的调节因子，其基因突变与多种疾病发生有关。RUNX转录因子家族由Runx1、Runx2和Runx3组成。RUNX蛋白通过调控CD4⁺T细胞和CD8⁺T细胞的发育和分化，参与适应性免疫系统的形成。该文主要就RUNX家族成员在T细胞发育过程中的调控机制进行综述。

肿瘤免疫疗法的出现改变了许多肿瘤的治疗格局，是肿瘤治疗领域的重大突破。虽然其在一些肿瘤类型中显示出良好疗效，然而，总体反应率仍然偏低，因此需要开发新型的免疫治疗药物及治疗策略。代谢重编程是肿瘤细胞的一大特征，肿瘤微环境中免疫代谢的复杂性是影响肿瘤免疫治疗疗效的重要因素。近年来的研究表明，靶向免疫代谢可以减少免疫抑制，增强抗肿瘤免疫，提高现有肿瘤免疫疗法的疗效甚至克服耐药。文章综述了靶向肿瘤免疫代谢途径治疗的最新进展，包括靶向糖代谢、氨基酸代谢、核苷酸代谢和脂质代谢等，为开发免疫代谢靶向治疗潜力，寻找新靶点提供新思路。

为提高临床利用多重微球流式免疫荧光法检测细胞因子结果的准确性，收集临床患者的外周血标本，比较血清、血浆、不同保存条件以及干扰物质对12种细胞因子(IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70、IL-17、IFN-γ、IFN-α和TNF-α)检测结果的影响。结果显示，血浆和血清中IFN-α、TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IL-12p70和IL-17水平差异无统计学意义(P＞0.05)，而IL-6和IL-8在血清中的水平显著高于血浆(P＜0.05)；EDTA-K2抗凝全血在4 ℃保存24 h对部分细胞因子浓度有一定影响，而离心获得的血浆在4 ℃保存48 h细胞因子水平显著降低(P＜0.05)；对检测过程中微球丢失或微球荧光信号异常增强的血浆标本经小鼠免疫球蛋白预处理后，检测信号与分析结果均恢复正常。该研究提示，临床检测细胞因子建议采用EDTA-K2抗凝的血浆标本，且细胞因子在4 ℃保存24 h较稳定；对于检测过程中出现微球丢失或荧光信号异常增强的标本，采用小鼠免疫球蛋白进行预处理是有效的解决方法。

中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular trap, NET)在17年前被发现，其在抗感染免疫中的作用不可估量。NET是由组蛋白和胞质颗粒蛋白组成的胞外DNA纤维，被认为是抵抗病原体入侵的天然免疫屏障，可以捕获病原体，降解细菌毒力因子并杀死细菌，对真菌、病毒和寄生虫均有一定的防御作用。此外，NET的过度形成可能导致一系列疾病，且携带的蛋白质也可损害组织。该文主要就NET在抗病原体感染、病原体对NET的免疫逃逸，以及NET的两面性作一综述。

研制一种人IL-6荧光免疫层析检测试剂卡，用于IL-6分子的临床快速检测，并且研制一种重组表达人IL-6蛋白作为IL-6检测试剂卡的标准品。首先获得人IL-6基因序列，经密码子优化后连接到表达载体pET30a，然后转化到大肠杆菌BL21感受态细胞诱导表达。经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside, IPTG)诱导后，得到可溶性表达的IL-6蛋白。经镍柱亲和层析纯化和超滤，得到重组人IL-6蛋白。基于荧光免疫层析技术及双抗体夹心法原理，应用时间分辨荧光微球制备IL-6荧光免疫层析检测试剂卡。经性能评估，试剂卡的空白限为5.2 pg/mL，变异系数在7.34%～11.11%之间，重复性较好；回收率在96.3%～107.2%之间；试剂卡37 ℃放置6周稳定性较好，与常见竞争物无交叉反应，参考值范围0～9.0 pg/mL；与电化学发光免疫分析(electrochemiluminescence immunoassay, ECLIA)比较临床样本检测结果相关性较好，相关系数r值为0.965。综上，研制的IL-6重组蛋白具有较高的纯度及浓度，可作为试剂盒检测的标准品；制备的IL-6定量检测试剂卡性能可满足临床应用的需求，且具有简便、快捷等优点。

胞内寄生菌在宿主细胞内长期定植与存活，其增殖离不开宿主环境，目前多数胞内寄生菌在宿主细胞中的感染增殖机制仍不非常清楚。新近研究表明，非编码RNA(non-coding RNA, ncRNA)能介导病原体与宿主细胞间的相互作用。胞内寄生菌在感染宿主细胞后引起宿主细胞胞核和胞浆多种ncRNA的差异表达，调控宿主细胞的生长与代谢，促进自身的感染与增殖。该文对宿主细胞中ncRNA在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)、伤寒沙门菌、衣原体、布鲁氏菌以及单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes, LM)等常见胞内寄生菌细胞内感染增殖中的作用机制进行简要综述，为胞内寄生菌致病机制的研究以及临床治疗开创新思路。

研究组织蛋白酶D(cathepsin D, Cat D)在骨肉瘤细胞中的表达，并通过shRNA技术沉默Cat D，探讨该分子对骨肉瘤细胞MG63和U2OS增殖、凋亡及侵袭的作用和机制。构建sh-Cat D质粒及阴性对照质粒sh-NC并转染至骨肉瘤细胞MG63和U2OS中，RT-PCR和Western blotting检测Cat D在骨肉瘤细胞中的表达；CCK-8法、克隆形成实验和EdU荧光染色实验检测骨肉瘤细胞的增殖活性；Transwell实验检测肿瘤细胞的侵袭能力；FACS检测肿瘤细胞的凋亡情况；Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白(Bax和Bcl-2)的表达及Akt/mTOR信号通路相关蛋白(Akt和mTOR)的磷酸化水平。结果显示，相较健康人成骨细胞hFOB，Cat D在骨肉瘤细胞中的表达显著升高，尤其是MG63和U2OS细胞中Cat D的高表达均显著(均P＜0.001)。与sh-NC组相比，Cat D沉默显著抑制MG63和U2OS细胞的增殖和侵袭(均P＜0.001)。与sh-NC组相比，Cat D沉默通过上调Bax表达和下调Bcl-2表达促进肿瘤细胞的凋亡(均P＜0.001)。同时，Western blotting检测结果显示，与sh-NC组相比，Cat D沉默显著降低肿瘤细胞Akt和mTOR蛋白的磷酸化水平(均P＜0.001)。此外，Akt/mTOR信号通路抑制剂(Wortmannin，渥曼青霉素)可增强Cat D沉默对肿瘤细胞凋亡和侵袭的影响，而Akt/mTOR通路激动剂(740 Y-P)可逆转上述影响(均P＜0.001)。由此，Cat D在骨肉瘤细胞中高表达，沉默Cat D可以通过抑制Akt/mTOR信号通路的磷酸化水平上调骨肉瘤细胞的凋亡活性并抑制细胞生长，提示Cat D可能成为骨肉瘤的潜在治疗靶点。

为探讨miR-30b-5p靶向淋巴样特异性解旋酶（helicase lymphoid-specific，HELLS）对肺腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制，通过生物信息学分析miR-30b-5p和HELLS在肺腺癌组织中的表达及其与临床表型的关系；将体外培养的A549和Calu-3细胞分为miR-NC组（转染miR-NC）、miR-30b-5p组（转染miR-30b-5p）、miR-30b-5p+HELLS组（转染miR-30b-5p和HELLS），采用RT-PCR检测各组细胞miR-30b-5p和HELLS mRNA的表达，Western blotting检测各组细胞核蛋白抗原Ki67、HELLS蛋白的表达，CCK-8检测各组细胞增殖情况，克隆形成试验检测各组细胞克隆形成数，FACS检测各组细胞周期及凋亡率，双荧光素酶报告试验验证miR-30b-5p与HELLS的靶向关系；建立肺腺癌裸鼠移植瘤模型，分为miR-NC组、miR-30b-5p组，记录裸鼠肿瘤体积、质量，免疫组化分析2组移植瘤Ki67蛋白表达。结果显示，GEO2R和TCGA数据库分析表明，miR-30b-5p在肺腺癌组织中表达下调，且其表达水平与患者生存期、N分期、复发和预后有关（P<0.05）。HELLS在肺腺癌组织中的表达水平高于癌旁组织（P<0.05），且其表达水平与患者肿瘤TNM分期、肿瘤分级、预后和生存期有关（P<0.05）。在A549和Calu-3细胞中，与miR-NC组比较，miR-30b-5p组miR-30b-5p表达量、G0/G1期细胞数、细胞凋亡率增加（P<0.05），细胞活力、克隆形成数、S期细胞数、HELLS mRNA水平及Ki67、HELLS蛋白水平显著降低（P<0.05）；与miR-30b-5p组比较，miR-30b-5p+HELLS组G0/G1期细胞数、细胞凋亡率降低（P<0.05），细胞活力、克隆形成数、S期细胞数及Ki67、HELLS蛋白水平增加（P<0.05）。双荧光素酶报告试验表明，miR-30b-5p可靶向调控HELLS。与miR-NC组比较，miR-30b-5p组裸鼠移植瘤体积、质量及Ki67水平降低（P<0.05）。该研究提示，miR-30b-5p可靶向负调控HELLS的表达，抑制肺腺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡。

为探究miR-let-7a对LPS诱导的人系膜细胞(human mesangial cell, HMC)增殖和炎症反应的影响及其通过调节PI3K/Akt信号通路发挥作用的机制，体外条件下用0.1 μg/mL LPS处理HMC，CCK-8法检测各时间点细胞活性；Western blotting检测HMC增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、凋亡相关蛋白BAX及信号通路蛋白PI3K、p-Akt的表达情况；qPCR检测细胞中miR-let-7a及炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6和Ⅳ型胶原蛋白mRNA的表达。转染miR-let-7a mimic或inhibitor改变HMC中miR-let-7a的表达，或使用抑制剂LY294002阻断HMC中PI3K/Akt信号通路，观察不同处理对HMC增殖、炎症反应及PI3K/Akt信号通路激活的影响。结果显示，LPS处理可诱导HMC增殖和炎症反应，抑制miR-let-7a的表达(均P＜0.05)并激活PI3K/Akt信号通路(均P＜0.01)；与LPS组相比，过表达miR-let-7a可下调LPS诱导的HMC增殖和炎症反应，抑制PI3K/Akt信号通路的激活(均P＜0.05)；反之，下调miR-let-7a水平可促进由LPS刺激引起的细胞增殖、炎症反应及PI3K/Akt信号通路激活(均P＜0.05)；阻断PI3K/Akt信号通路也可抑制HMC的活性和炎性因子产生(均P＜0.05)。综上，在经LPS处理的HMC中，miR-let-7a可通过调节PI3K/Akt信号通路抑制HMC的增殖与炎症反应。

为检测病毒性肺炎患儿CD8⁺T细胞的分子标志物和不同细胞因子的表达水平，分析检测指标之间的相关性，判断疾病状态下机体的免疫功能，选取65例病毒性肺炎患儿和49例健康体检儿童，应用FACS检测CD8⁺CD38⁺、CD8⁺CD28⁺、CD8⁺PD-1⁺、CD8⁺T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子3(T cell immunoglobulin and mucin domain 3，Tim-3)⁺T细胞占总淋巴细胞百分比，应用流式微球技术(cytometric bead array, CBA)检测IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α、IFN-γ细胞因子的水平，并分析具有不同表面标志物的CD8+T细胞与细胞因子的相关性。结果显示，与对照组比较，病毒性肺炎组患儿的CD8⁺CD38⁺、CD8⁺CD28⁺、CD8⁺PD-1⁺、CD8⁺Tim-3⁺T细胞比例升高(P＜0.05)，IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平升高(P＜0.05)，IL-10水平降低(P=0.028)；CD8⁺CD38⁺T细胞比例与IL-2、IL-4、IL-6、IL-17A、IFN-γ水平呈正相关(P＜0.05)；CD8⁺CD28⁺T细胞比例与IL-10、IFN-γ水平呈正相关(P＜0.05)，与IL-2、IL-4、IL-6水平呈负相关(P＜0.05)；CD8⁺PD-1⁺T细胞比例与IL-4、IL-6、IL-17A、TNF-α、IFN-γ水平呈正相关(P＜0.05)；CD8⁺Tim-3⁺T细胞比例与IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平呈正相关(P＜0.05)。不同病毒感染组之间存在差异(P＜0.05)。该研究提示，病毒性肺炎患儿存在免疫活化与抑制的紊乱状态和细胞因子的分泌异常，综合检测患儿免疫指标可以评估机体的免疫状态。

为探讨人B细胞激活因子(B cell activating factor belonging to the TNF family, BAFF)及BAFF受体(BAFF-receptor, BAFF-R)单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)与肾移植的相关性，随机选取肾移植受者310例和健康体检对照者51例，采集抗凝外周血和血清。选取5个BAFF/BAFF-R SNP, 以Taqman qRT-PCR进行基因分型。Hardy-Weinberg平衡检验结果提示基因型分布具有群体代表性。以估算的肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate, eGFR)90 mL/(min·1.73 m²)为临界值，将肾移植受者分为eGFR正常组和异常组。Logistic回归分析显示，在杂合遗传模型下BAFF rs9514828 CT基因型携带者移植肾功能异常概率比其他基因型携带者显著升高(OR=1.597，95%CI 1.012~2.519, P＜0.05)，与血清可溶性BAFF(soluble BAFF, sBAFF)水平和群体反应性抗体(panel reactive antibody, PRA)阳性率无显著相关性。其余4个SNP基因型在组间的差异无统计学意义。Haploview 4.0软件分析显示，BAFF rs16972194、rs9514828、rs16972197间存在强连锁不平衡。单倍体分析显示，单倍体“GCG”携带者移植肾功能正常概率显著升高(OR=0.381，95%CI 0.156~0.931, P＜0.05)。该研究提示，对肾移植受者来说，BAFF rs9514828 CT基因型可能是移植肾功能异常的风险因素，单倍体GCG可能是移植肾功能正常的保护因素。

肿瘤微环境在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma, HNSCC)等多种癌症中已得到广泛研究，其各组成部分对肿瘤的预后有重要指示意义，并直接指导肿瘤的治疗策略。该文综述了HNSCC微环境中各组成成分与肿瘤的相互作用关系，包括免疫细胞如中性粒细胞、巨噬细胞及T细胞，以及免疫检查点PD-1/PD-L1。

中性粒细胞是固有免疫应答中重要的效应细胞之一，是机体抵抗病原体入侵的第一道防线。随着研究的不断进展，人们意识到中性粒细胞不仅参与了炎症反应和组织损伤修复，浸润肿瘤组织的中性粒细胞还可以根据不同的肿瘤免疫微环境(tumor microenvironment，TME)特征发挥抗肿瘤或促肿瘤的作用。不同功能的中性粒细胞可能具有不同的表型，且具有一定的可塑性。该文将从中性粒细胞的生物学特征谈起，对TME中不同功能的中性粒细胞的表型、免疫抑制性中性粒细胞发挥功能的可能机制以及中性粒细胞在肿瘤研究中的临床应用加以综述。

为比较甲氨蝶呤(methotrexate, MTX)联合托法替布(tofacitinib, TOF)/益赛普(etanercept, YSP)/来氟米特(leflunomide, LEF)及柳氮磺吡啶(sulfasalazine, SAZ)对难治性类风湿关节炎(refractory rheumatoid arthritis, RRA)患者的疗效，收集2019年3月至2020年9月于衡水市人民医院就诊的300例RRA患者作为研究对象，按照随机数字表法将患者分为TOF组、YSP组和LEF+SAZ组，每组各100例。所有患者常规给予MTX治疗，TOF组患者另给予TOF治疗，YSP组患者另给予YSP治疗，LEF+SAZ组患者另给予LEF+SAZ联合治疗。持续给药3组患者并观察6个月，比较他们接受治疗1、3、6个月后的临床疗效［美国风湿病学会(American College of Rheumatology, ACR)20、ACR50、ACR70］、疾病活动度评分(disease activity score 28, DAS28)、手腕部骨破坏评分(scoring radiographs in rheumatoid arthritis, SHARP)、炎性因子(IL-6和TNF-α)水平和不良反应发生情况。结果显示，治疗后3组患者的ACR20、ACR50和ACR70随治疗时间延长而逐渐升高，且治疗6个月后TOF组各项ACR应答率均显著高于YSP组和LEF+SAZ组(均P＜0.05)。治疗后3组患者的DAS28、SHARP、IL-6和TNF-α水平均显著低于治疗前(均P＜0.05)，且治疗6个月后，TOF组上述指标(DAS28、SHARP、IL-6和TNF-α水平)均显著低于YSP组和LEF+SAZ组(均P＜0.05)。治疗期间3组患者的不良反应发生率经对比差异无统计学意义(均P＞0.05)。由此，MTX联合TOF可有效提高RRA患者的治疗效果，其在降低DAS28，提高临床疗效等方面显著优于MTX联合YSP或MTX联合LEF和SAZ，而三者安全性相当。

干扰素调节因子4(interferon regulatory factor 4, IRF4)为一种进化上极为保守的调控分子，在多种免疫细胞分化的关键阶段均不同程度表达，就其对固有免疫细胞谱系分化的作用而言，IRF4是参与调控M2样巨噬细胞极化、单核细胞衍生DC和常规DC2（conventional DC 2, cDC2)分化的关键转录因子之一；而在适应性免疫细胞亚群分化的命运决定中，IRF4在多个层次发挥全方位的调控作用，体现在IRF4参与调控初始CD4⁺T细胞向各个细胞亚群的分化［Th1、Th2、Th9、Th17、Treg、滤泡辅助性T细胞（follicular helper T cell, Tfh)］，此外它还参与调控初始CD8⁺T细胞分化为效应细胞；同时IRF4亦参与调控B细胞分化的周期和浆细胞功能从而影响体液免疫。 本文就IRF4参与调控免疫细胞谱系分化及命运决定的最新研究进展做出总结。

维得利珠单抗是一种人源化的抗整合素α4β7单克隆抗体，在传统的认知中具有很高的肠道选择性，对炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)患者免疫系统的影响大部分都局限在肠道内。在人源化小鼠模型中，维得利珠单抗会阻断T细胞向炎症肠道组织的转运。因此，阻止T细胞转运到肠道，被认为是维得利珠单抗减轻肠道炎症的主要作用机制。然而，随着维得利珠单抗的广泛应用，其对除肠道以外机体其他系统的影响也时有报道，同时其作用的细胞亚群也不再局限于T细胞。维得利珠单抗对IBD患者肠道内的固有免疫细胞以及B细胞也有作用。此外，维得利珠单抗还可能用于治疗与肠内疾病活动相关的一些肠外表现(extra-intestinal manifestation, EIM)，如周围关节炎和结节性红斑。该文总结了维得利珠单抗对IBD患者各系统的影响，以期帮助全面认识维得利珠单抗的作用机制。

作为人体内最重要的APC, DC是变应性鼻炎免疫应答环节中必不可少的关键因素。近年来，围绕DC与变应性鼻炎的相关性研究发展迅速。DC是连接固有免疫与适应性免疫的“桥梁”，它与多种共刺激分子、黏附分子、T细胞和B细胞的相互作用影响着变应性鼻炎的免疫应答。该文就DC在变应性鼻炎中的作用，它与多种免疫分子对变应性鼻炎的影响，它在鼻黏膜中对变应性鼻炎的调节作用，及与它相关的变应性鼻炎的治疗方法等方面展开综述。

CD8⁺ Treg因其起源、诱导条件、生理病理情况、特征性标志物以及负向调控机制的不同，具有较大异质性，据此可将CD8⁺ Treg分为多种不同表型的亚群。为深入了解CD8⁺ Treg的特性，该文基于近期的最新研究进展，针对CD8⁺ Treg各个异质性亚群的来源、谱系分化、可能的转录因子及其诱导调控机制，即异质性及其免疫生物学特性做出梳理和归纳总结。

为探讨脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)经酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B, TrkB)-Ca²⁺信号影响哮喘小鼠气道高反应的分子机制，应用卵白蛋白(ovalbumin, OVA)建立支气管哮喘小鼠模型，进行肺泡灌洗液(broncho alveolar lavage fluid, BALF)细胞计数及分类计数；H-E染色观察肺组织炎性改变并测定气道壁厚度；ELISA检测BALF、血清、肺组织中BDNF水平；免疫组化、Western blotting和qRT-PCR检测肺组织中BDNF、TrkB蛋白和mRNA的表达变化；瞬时转染技术将BDNF小干扰RNA(si-BDNF)和蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)小干扰RNA(si-PKC)转染入被分离的哮喘模型组小鼠肺动脉平滑肌细胞内沉默BDNF和PKC的表达，比色法测定肺组织细胞中Ca²⁺水平变化。结果显示，与对照组比较，哮喘模型组小鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和中性粒细胞显著增加(P＜0.05)，单核细胞显著减少(P＜0.05)；肺组织中有大量炎性细胞浸润，且气道壁变厚(P＜0.05)；BALF、血清和肺组织中BDNF水平均显著升高(P＜0.01)；肺组织中BDNF、TrkB蛋白和mRNA水平均显著升高(P＜0.001)；肺组织细胞中Ca²⁺水平上调(P＜0.01)， 抑制BDNF和PKC后肺组织细胞中Ca²⁺水平下调(P＜0.05)。该研究提示，BDNF可能通过激活下游PKC信号通路使肺组织Ca²⁺水平增加，血管收缩，进而参与哮喘气道高反应的形成。

为探究中性粒细胞胞外诱捕网（neutrophil extracellular trap, NET）对乳腺癌增殖、侵袭的影响及其相关机制，对临床患者肿瘤和癌旁组织进行环状RNA（circular RNA, circRNA）芯片检测，并使用qRT-PCR进行验证；采用免疫组化法检测组织中淋巴细胞抗原6复合物（lymphocyte antigen 6 complex, ly6g）和中性粒细胞弹性蛋白酶（neutrophil elastase, NE）的表达情况；分离外周血多形核中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophil, PMN），刺激形成NET，将纯化后的NET与乳腺癌细胞系MCF7共孵育，通过脂质体将si-circRNA_0080220转染至MCF7细胞，采用qRT-PCR检测circRNA_0080220和miR-1271的表达变化；通过CCK-8、细胞划痕和Transwell试验检测MCF7细胞增殖、迁移和侵袭的变化；利用双荧光素酶报告试验检测circRNA_0080220与miR-1271的相关性。结果显示，乳腺癌患者肿瘤部位的ly6g和NE表达水平高于癌旁组织；肿瘤组织和癌旁组织共有1 023个差异circRNA，其中circRNA_0080220表达差异较大；在体外试验中，NET刺激MCF7细胞后能上调circRNA_0080220表达，并促进其增殖、迁移和侵袭（P＜0.001）；沉默circRNA_0080220可有效拮抗NET对MCF7的促增殖及侵袭作用（P＜0.01）；circRNA_0080220能够靶向抑制miR-1271表达；在乳腺癌组织中，miR-1271的表达水平较癌旁组织显著降低（P＜0.01）。该研究提示，circRNA_0080220具有miR-1271的分子海绵功能；NET通过上调乳腺癌circRNA_0080220的表达促进肿瘤细胞的增殖和侵袭。

特发性炎性肌病(idiopathic inflammatory myopathy, IIM)是自身免疫性炎症性疾病，主要有对称性四肢的近端肌无力、肌酶升高、皮疹等表现，并伴多系统器官受累，该病的病因及发病机制目前尚不清楚。中性粒细胞是免疫系统重要的组成部分，近10年诸多研究者参与对中性粒细胞的深入研究，发现它在固有免疫和适应性免疫中都能发挥重要作用。中性粒细胞可以通过释放蛋白酶、促炎细胞因子级联等方式促进自身免疫性疾病的发生，同时通过形成中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular trap, NET)调节免疫反应。该文就中性粒细胞在IIM发病机制中的作用进行综述，希望对IIM发病机制的研究有所帮助。

为探究分化群56(cluster of differentiation 56，CD56)、分化群107a(cluster of differentiation 107a, CD107a)和自然杀伤细胞2族成员D(natural killer group 2 member D, NKG2D)在卵巢型子宫内膜异位症(endometriosis, EM)患者在位内膜和异位内膜中的表达情况，探讨EM发生发展过程中NK细胞数量及毒性的变化和其中关联，收集连云港市妇幼保健院2018年1月至2020年12月40例卵巢型EM患者在位内膜、异位子宫内膜以及10例健康人子宫内膜组织，免疫组化法检测CD56、CD107a和NKG2D表达水平，分析其表达程度。结果显示，卵巢型EM患者CD56、CD107a和NKG2D的表达强度显著低于健康女性(均P＜0.01)，异位内膜组织CD56、CD107a和NKG2D表达强度低于其在位内膜(均P＜0.01)，且CD56、CD107a和NKG2D表达程度随着病变程度的增加逐渐下降(均P＜0.01)。由此，卵巢型EM患者的异位内膜组织中存在CD56、CD107a和NKG2D的表达下调，并且与病变程度存在一定的关联，提示异位子宫内膜可能是通过NKG2D途径降低NK细胞的数量及毒性，进而诱导局部的免疫逃逸。

越来越多的研究表明，动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)的发生与细胞焦亡特别是GSDMD (gasdermin D)介导的细胞焦亡有着密切的关系。AS中巨噬细胞、血管内皮细胞和血管平滑肌细胞等炎性细胞发生细胞焦亡导致斑块破裂引起血栓形成，从而引发急性冠状动脉综合征。在AS发展的过程中，动脉管壁内皮损伤和脂质沉积是主要的始动因素，它分别通过Caspase-1和Caspase-11/4/5的激活对GSDMD蛋白进行切割，介导经典和非经典细胞焦亡。GSDMD蛋白的N端迁移至细胞膜上，然后寡聚化在细胞膜上形成孔道，释放炎性因子IL-1β和IL-18到细胞间质中。炎性因子的释放进一步促进了血管内皮细胞的焦亡，细胞焦亡后其内容物、细胞因子和蛋白酶进入到细胞外基质中，加重了局部炎症反应，导致AS斑块破裂和心血管事件的发生。基于上述机制，直接靶向GSDMD以及靶向GSDMD诱导的细胞焦亡信号通路中的信号分子如炎性小体、Caspase-1、IL-1β和IL-18等的药物开发，为AS的治疗提供了理论依据和新思路。

为探究炎性疼痛通过下调miR-34a，介导X特异性失活转录本(X-inactive specific transcript，XIST)表达上调及通过维持巨噬细胞线粒体功能抗凋亡的机制，在雌性小鼠来源的细胞系J774A.1、女性SH-SY5Y细胞系中过表达miR-34a，或采用LPS处理后检测XIST表达，并分析miR-34a与XIST在患者体内的浓度相关性。 采用MitoTracker、四甲基罗丹明乙酯(tetramethylrhodamine ethyl ester，TMRE)染色分析J774A.1细胞系的线粒体体积及线粒体膜电位变化；海马(Seahorse)呼吸实验检测线粒体压力，分析正常及过表达miR-34a的J774A.1细胞线粒体功能；TUNEL实验评估细胞的凋亡情况。采用完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant, CFA)诱导急性炎症疼痛模型，分别检测炎症急慢性期小鼠的疼痛反应阈值与XIST及miR-34a表达量的关系；Real-time PCR检测健康对照组与复杂区域性疼痛综合征(complex regional pain syndrome, CRPS)患者的外周血XIST mRNA表达，比较两者间表达的差异。 结果显示，不区分性别比较对照组与CRPS组XIST表达差异无统计学意义(t=1.528，P=0.131)，仅分析男性患者，两组间差异无统计学意义(t=0.945，P=0.353)，单独分析女性患者可发现CRPS组的XIST mRNA表达量显著高于对照组(t=2.764，P=0.008)。 过表达miR-34a可降低J774A.1、SH-SY5Y细胞系中XIST的表达量，患者在体数据提示miR-34a与XIST的表达呈负相关(r2=0.681，P＜0.001)。LPS刺激J774A.1细胞可抑制miR-34a表达，上调XIST表达量。 小鼠疼痛模型建模4 h即可观察到XIST的表达上调(t=1.810，P<0.001)及miR-34a的表达下调(t=2.220，P<0.001)，而上述差异在第14天消失。 LPS上调线粒体体积及膜电位，而过表达miR-34a会导致二者下调，且2种处理的作用会发生相互抵消；LPS刺激可显著降低细胞的耗氧量(t=3.255，P=0.020)、ATP产生(t=4.323，P=0.014)及最大耗氧量(t=1.885，P=0.008)，而miR-34a过表达的影响则相反(t=4.245，P=0.004)；LPS可使细胞凋亡减少，miR-34a过表达可促进巨噬细胞的凋亡，过表达XIST可逆转miR-34a介导的细胞凋亡。由此，炎症反应可通过下调miR-34a促进XIST的表达，后者通过促进线粒体功能的维持减少细胞凋亡。 

为探讨同种异体肺移植受者术后血浆IL-10水平变化及其与细菌感染死亡的关联，研究收集肺移植后死亡受者和存活受者、长期预后良好受者和健康志愿者的血浆样本。血常规分析死亡受者的外周血免疫细胞分布；影像学检查观察死亡受者肺部病原体的感染情况；细菌体外培养和病原微生物高通量基因组测序分析死亡受者的病原体感染类型；Luminex多因子检测法监测全体血浆样本多细胞因子的浓度。结果显示，死亡受者术后外周血白细胞计数、中性粒细胞计数和百分比、CRP浓度、中性粒细胞计数/淋巴细胞计数比值均增加，红细胞计数、血小板计数等则减少；术后肺部出现高密度影；血液、支气管肺泡灌洗液和痰液中出现多种细菌混合感染。动态监测细胞因子浓度发现相较于存活受者、预后良好受者和健康志愿者，死亡受者术后血浆IL-10浓度、IL-10/IFN-γ比值均显著升高(均P＜0.000 1)。综上，研究首次发现血浆IL-10水平变化与受者发生临床细菌感染死亡有密切关联。

 在全球新冠疫情愈发严重的当下，记忆细胞在抗病毒感染中的优势使其受到了广泛的关注。最新的研究发现，CD4⁺ 记忆T细胞(memory T cell, TM)的分化与效应应答需要特定抗原提呈细胞与微环境中细胞因子的辅助。它们严密地调控着胞内的转录因子及能量代谢。该文总结并讨论了调控CD4⁺ TM生成、维持及再次应答的关键机制。在不同疾病背景下精准调控CD4⁺ TM的数量与功能将会是未来的一个巨大挑战。

为探究小檗碱（berberine, Ber）对 LPS诱导的神经元损伤及腺苷一磷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate-activated protein kinase, AMPK）-mTOR-p70核糖体蛋白S6激酶（ribosomaiprotein S6 kinase, S6K）信号通路的影响，MTT法筛选最佳的Ber处理HT22神经元浓度。将HT22细胞分为NC组、LPS组、Ber+LPS组和AMPK抑制剂Compound C（Com.C）+Ber+LPS组。FACS检测HT22细胞凋亡率；qRT-PCR法检测HT22细胞IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA相对表达量；DCFH-DA荧光探针检测HT22细胞中活性氧类（reactive oxygen species, ROS）含量；TBA法、比色法和WST-1法分别检测HT22细胞中丙二醛（malondialdehyde, MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase, GSH-Px）和总超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）的含量；Western blotting检测HT22细胞中B淋巴细胞瘤2基因（B-cell lymphoma 2, Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-associated X protein, BAX）、脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor, BDNF）、原肌球蛋白受体激酶B（tropomyosin receptor kinase B, TrkB）、神经生长因子（nerve growth factor, NGF）、磷酸化AMPK（p-AMPK）、磷酸化mTOR（p-mTOR）和磷酸化p70S6K（p-p70S6K）蛋白的表达水平。结果显示，与0 μmol/L Ber比较，5 μmol/L和10 μmol/L Ber处理对HT22细胞增殖活力的影响差异无统计学意义（均P＞0.05），15 μmol/L和20 μmol/L Ber处理可显著降低HT22细胞的增殖活力（均P＜0.05），因此选择10 μmol/L Ber用于后续研究。与NC组相比, LPS处理可增加HT22细胞的凋亡率（P＜0.05），上调细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA相对表达水平（均P＜0.05），上调ROS和MDA的含量以及BAX、p-mTOR和p-p70S6K蛋白的表达水平（均P＜0.05），下调细胞中GSH-Px和SOD含量以及Bcl-2、BDNF、TrkB、NGF和p-AMPK蛋白表达水平（均P＜0.05）。Ber干预显著减轻了LPS诱导的HT22细胞损伤（均P＜0.05），Com.C预处理部分逆转了Ber处理对LPS诱导的HT22细胞的保护作用（均P＜0.05）。由此，Ber可能通过调控HT22细胞中AMPK-mTOR-p70S6K信号通路缓解LPS诱导的神经元损伤。

新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019, COVID-19)是由严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2型(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2)感染所致。 机体抗病毒的适应性免疫应答主要依赖T细胞选择性地清除病毒感染宿主细胞，而T细胞受体(T cell receptor, TCR)的结构决定其对病毒抗原决定簇的特异性识别，感染者TCR互补决定区3(complementarity determining region 3, CDR3)组库的特征在COVID-19的发生与发展中有重要的提示意义。 此外，人类白细胞抗原(human leukocyte antigen, HLA)是不同个体对抗原引起免疫应答差异的主要原因，在人体的免疫应答中发挥着重要作用。文章重点概述TCR CDR3组库的特征和HLA等位基因的组成与COVID-19之间关系的研究概况和进展。 

NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3, NLRP3)炎症小体是一种蛋白质复合体，可促进Caspase的活化和IL-1β的成熟，在多种炎症的发生、发展过程中起促进作用。 牙周炎(periodontitis, PD)的发生与牙周组织的菌群失调有关，NLRP3炎症小体参与中性粒细胞、巨噬细胞、破骨细胞(osteoclast, OC)和人牙周膜成纤维细胞（human periodontal liqament fibroblast, HPLF）的活化过程。 该文归纳了相关免疫细胞及基质细胞的NLRP3炎症小体对PD的影响，并简述了与NLRP3炎症小体相关的PD治疗新思路。

为探讨副交感神经对卵清蛋白（ovalbumin, OVA）诱导哮喘小鼠气道炎症和Th17型免疫反应的影响和可能机制，将BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、GTS-21［α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7 nicotinic acetylcholine receptor, α7nAChR）激动剂］干预组和α-银环蛇毒素（α-bungarotoxin, α-BGT）（α7nAChR拮抗剂）干预组。除对照组外，其余各组采用OVA构建小鼠哮喘模型， 每次激发前GTS-21干预组经静脉注射GTS-21，α-BGT干预组皮下注射α-BGT。ELISA检测支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF）中TGF-β1和IL-6的浓度；H-E染色观察肺组织病理学变化；RT-PCR检测肺组织中c-Rel和IL-17的mRNA表达水平；Western blotting检测肺组织中c-Rel、IL-17和RORγt蛋白的表达水平；FACS检测各组小鼠脾脏单细胞悬液中Th17占CD4⁺T细胞的百分比。结果显示，OVA刺激后肺组织中有大量炎症细胞的浸润；与哮喘组比较，GTS-21干预能显著降低BALF中TGF-β1和IL-6的水平（均P＜0.01），下调肺组织中RORγt蛋白、c-Rel和IL-17的mRNA及蛋白表达水平（均P＜0.05），逆转OVA诱导的CD4⁺T细胞向Th17分化（P＜0.01）；α-BGT干预组TGF-β1浓度显著升高（P＜0.05），IL-6的浓度无明显变化（P＞0.05）， RORγt蛋白、c-Rel和IL-17的mRNA及蛋白表达水平显著升高（均P＜0.01），Th17占CD4⁺T细胞的百分比显著升高（P＜0.01）。由此，副交感神经能抑制炎症反应，调控哮喘模型中Th17型细胞免疫反应，为探索一种新的哮喘治疗策略提供了方向。

该文旨在探索敲低整合素相关蛋白CD47对卵巢癌细胞生物学行为和功能的作用。在卵巢癌细胞转染靶向CD47的小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)后，采用Western blotting、qRT-PCR、流式细胞术验证敲低效率；采用CCK-8、划痕实验、Transwell观察细胞增殖、迁移和侵袭情况；采用qRT-PCR检测细胞中CD47、IL-6、C-X-C基序趋化因子配体1(C-X-C motif chemokine ligand 1，CXCL1)、CXCL8、C-C基序趋化因子配体20(C-C motif chemokine ligand 20，CCL20)mRNA表达；采用ELISA检测细胞上清IL-6和CXCL8的释放；采用Transwell观察敲低CD47后卵巢癌细胞对巨噬细胞迁移的影响。结果发现敲低CD47分子对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭无明显作用；而敲低CD47可降低卵巢癌细胞趋化因子CXCL1、CXCL3、CXCL8、CCL20和IL-6的表达，且明显地降低巨噬细胞的迁移能力。该研究表明卵巢癌细胞中CD47分子能够通过调节自身趋化因子表达从而影响巨噬细胞的迁移能力。

为探讨重组重叠肽(recombinant overlapping peptide, ROP)-人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)16E7蛋白介导的细胞免疫应答在评估HPV16感染患者病变风险及转归中的临床价值及意义，选取HPV16阳性病例131例, 其中慢性炎症42例、低度鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion, LSIL)33例、高度鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion, HSIL)39例、宫颈癌17例。利用ROP技术设计ROP-HPV16E7蛋白，通过酶联免疫斑点法(enzyme-linked immunospot assay, ELISPOT)检测HPV16E7特异性T细胞反应，分析HPV16感染患者不同病变阶段特异性T细胞的免疫力。结果显示，在17例宫颈癌患者中只有1例(5.9%)HPV16E7特异性T细胞反应阳性，显著低于癌前病例组(P＜0.05)。经1年随访，大多数持续感染HPV的患者没有表现出HPV16E7特异性T细胞反应(28/33, 84.8%)。此外，3例组织病理检查显示病情进展的患者(其中1例进展为HSIL，2例进展为LSIL)HPV16E7特异性T细胞反应均为阴性(P=0.001)。HPV16E7特异性T细胞反应阳性的患者均无进一步恶化。该研究提示，HPV16E7特异性T细胞免疫在病毒清除中具有重要意义，并有助于阻止病情的进展，对判断疾病转归具有指导意义，同时可以辅助临床诊断，避免过度干预和治疗。

免疫治疗已成为肿瘤治疗的主要方式之一。CTLA-4和PD-1在肿瘤免疫逃逸中起关键作用，然而PD-1和CTLA-4的低反应率是目前肿瘤免疫治疗面临的主要挑战。新一代抑制性免疫检查点淋巴细胞活化基因3(lymphocyte activation gene 3，LAG-3)在人体免疫系统中发挥重要的调节作用。LAG-3在各种类型的TIL上高表达，通过多种机制介导肿瘤免疫逃逸。LAG-3还可以和PD-1在TIL中共表达，联合阻断LAG-3和PD-1对抑制免疫逃逸、增加抗肿瘤反应、增强T细胞增殖具有协同作用，已成为改善当前肿瘤免疫治疗缺陷最有希望的免疫疗法之一。因此，深入了解LAG-3的生物学特点并进一步探究其作用机制具有重要意义。该文就LAG-3的结构、功能及其在肿瘤免疫中的研究进展进行综述。

为探讨芒柄花苷靶向腺苷A1受体（adenosine  receptor A1, ADORA1）抑制肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制，将肺腺癌细胞（SPC-A1和A549）分成对照组（细胞不处理）、芒柄花苷组（芒柄花苷处理细胞）、ADORA1组（转染ADORA1质粒）和芒柄花苷+ADORA1组（经芒柄花苷处理细胞后转染ADORA1质粒）。通过生物信息学分析芒柄花苷的作用靶点及其恶性行为。以不同浓度芒柄花苷干预细胞， 随后通过MMT法检测细胞活力、细胞计数试剂盒（CCK-8）检测各组细胞增殖能力、Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。裸鼠移植瘤实验检测芒柄花苷体内抑制细胞增殖能力。免疫组化检测增殖细胞抗原Ki-67。Western blotting检测细胞ADORA1蛋白表达。生物信息学结果显示ADORA1是芒柄花苷的作用靶点之一，且在肺腺癌中高表达，与临床恶性行为有关。细胞实验表明，芒柄花苷可以抑制肺腺癌细胞活力（P＜0.05），且能抑制其细胞增殖、迁移和侵袭（P＜0.05）。裸鼠移植瘤实验显示，芒柄花苷处理明显抑制移植瘤体积和重量增长（P＜0.05）。分子水平揭示，芒柄花苷组中Ki-67相对表达量明显低于对照组（P＜0.05）；芒柄花苷呈浓度和时间依赖性抑制ADORA1蛋白表达（P＜0.05）；与空白载体组相比， ADORA1组中ADORA1蛋白表达增加（P＜0.05）。芒柄花苷+ ADORA1组中ADORA1蛋白表达、增殖、迁移和侵袭细胞均高于芒柄花苷组（P＜0.05）。研究表明，芒柄花苷通过下调ADORA1表达抑制肺腺癌癌细胞增殖、迁移和侵袭。

为探讨粪菌移植（fecal microbiota transplantation, FMT）对顽固性便秘小鼠肠道Treg/Th17平衡及相关细胞因子的影响，将40只C57BL/6小鼠随机分为4组：空白组、模型组、标准组和FMT组, 每组10只。除空白组外，其他3组采用盐酸洛哌丁胺灌胃构建顽固性便秘模型。空白组、模型组小鼠自由饮水；标准组小鼠给予乳果糖灌胃；FMT组小鼠给予FMT灌胃，共7 d。记录小鼠体质量、排便量、排便频率及粪便含水量变化，进行肠道菌群分析，H-E染色观察结肠组织病理变化，FACS检测结肠组织Treg、Th17数量，ELISA检测结肠组织TGF-β、IL-10、IL-17A及IL-22水平。结果显示，与模型组比较，标准组、FMT组小鼠体质量显著升高（P＜0.05），排便量、排便频率及粪便含水量均升高（P＜0.05）。标准组、FMT组均能促进小鼠疣微菌科、乳杆菌科菌繁殖。与模型组比较，FMT组小鼠结肠壁基本正常，炎症消退，黏膜基本愈合。与模型组比较，标准组、FMT组小鼠结肠组织中Treg数量增加，Th17数量减少，TGF-β、IL-10水平升高，IL-17A、IL-22水平下降（P＜0.05）。该研究提示，FMT可促进顽固性便秘小鼠疣微菌科、乳杆菌科菌生长，促进结肠损伤恢复，促进肠黏膜屏障功能恢复，促进Treg/Th17平衡。

为探讨IL-17A增强脂肪来源间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cell, ADSC)对外周血淋巴细胞的免疫调节作用及机制，收集天津市人民医院4例腹部外科术后留取的患者皮下脂肪组织和外周血，分离、培养、鉴定ADSC并将其分为IL-17A预处理(ADSC-17组)及未处理(ADSC组)2组，分别与外周血淋巴细胞在植物血凝素(phytohemagglutinin, PHA)+IL-2刺激条件下共培养。 MTT法检测活化淋巴细胞的增殖抑制率；FACS检测CD4⁺CD25⁺ T淋巴细胞百分比；ELISA检测培养上清液TGF-β1含量。 结果显示，分离培养的ADSC与ADSC-17组均高表达分化群(cluster of differentiation, CD)90、CD105和CD73，均具有分化为成骨及成脂细胞的能力。 与ADSC组比较，ADSC-17组显著提高活化淋巴细胞的增殖抑制率(均P＜0.01)，呈剂量依赖关系。 ADSC-17组CD4⁺CD25⁺T淋巴细胞百分比及培养上清液TGF-β1含量相比ADSC组均显著升高(均P＜0.05)。 由此，IL-17A预处理可增强ADSC抑制淋巴细胞增殖及诱导CD4⁺CD25⁺T淋巴细胞分化的能力，是诱导淋巴细胞低反应性的有效策略。