朱利国,邹贤,范俊,等
现代免疫学. 2018, 38(1): 31-35.
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研制一种操作简易、灵敏度高的荧光免疫层析试纸条,用于定量检测甲状旁腺激素(parathyroid hormone, PTH)。采用双抗体夹心法和荧光免疫层析技术,将标记抗体LA001与荧光微球结合于聚酯膜结合垫上,检测抗体CA001包被在硝酸纤维素膜上作为检测线(T),另将质控抗体(羊抗鼠IgG)包被在相互平行的硝酸纤维素膜上作为质控线(C),过量的鼠源标记的荧光微球在质控线处聚集产生质控荧光信号,待测样中的PTH在T处形成包被抗体-PTH抗原-标记抗体的夹心复合物并产生荧光信号,通过荧光检测仪计算出定量结果。试纸条检测PTH灵敏度最低可达0.8pg/mL,与促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone, TSH)无交叉反应,不同批次试剂4℃放置6个月稳定性好,批内变异系数(coefficient of variation, CV)为5.32%,批间CV值为6.74%。与电化学发光免疫法(electrochemiluminescence immunoassay, ECLIA)比较相关性较好,R2=0.993,差异无统计学意义,甲状旁腺组织结果与非甲状旁腺组织结果则有明显差异(P < 0.01)。采用该荧光免疫层析试纸条,不仅可以提供较高的灵敏度和特异度,而且操作简单,适合临床工作的需要。